二 重 標識 水 法

05~0. 2% Tween20/PBS (PBS-T) ・一次抗体 ・蛍光標識二次抗体 ・DAPI ・水溶性封入剤 方法(細胞培養・標本作製) ※当社におけるNRK細胞を用いた細胞標本作製の一例をご紹介いたします。 1. 細胞培養 NRK細胞を10 cmシャーレで培養する。70%コンフルエント程度になったら細胞を回収して細胞数をカウントします。 2. 細胞播種―① 6wellカルチャースライドに、オートクレーブをかけた18 mm×18 mmのカバーガラスを置きます。 3. 細胞播種―② 5×10 5 cells/mLに調整した細胞溶液をカバーガラスの上に200 µL滴下します。(1×10 5 /well) その後、37℃ 5%CO 2 インキュベーターで1時間程度培養します。 4. 細胞播種―③ 37℃ 5%CO 2 インキュベーターで1時間程度培養した後、培地を2 mLずつ足し、さらに一晩培養します。 5. 細胞播種―④ ※ここではオートファジー比較のため、NutrientとStarvedの処理を行いました。特に処理する必要がない場合は、 6. 細胞固定 へ。 翌日、顕微鏡で細胞が接着していることを確認したのち、培地をアスピレーターを用いて取り除きます。Nutrientのwellには10%FCS-RPMIを200 µL滴下し、StarvedのwellにはRPMIを200 µL滴下します。その後、37℃ 5%CO 2 インキュベーターで3時間程度培養します。 6. 細胞固定 顕微鏡で細胞が接着していることを確認します。培地を捨て、PBSで細胞を1回洗浄した後、4%パラホルムアルデヒド溶液を200 µLを静かに添加し、室温で10分間静置します。 7. 膜透過処理 細胞固定液を除いてPBSで5分ずつ2回洗浄し、100 µg/mL Digitonin in PBS (SIGMA D141-100MG)を200 µLずつ滴下し、室温で10分間静置します。 8. 二重標識水法 原理. 一次抗体反応 上清を除いてPBSで2回洗浄した後、PBSで希釈した一次抗体をそれぞれ200 µLずつ滴下し、室温で1時間反応させます。 9. 蛍光標識または酵素標識二次抗体反応 PBSで3回洗浄した後、PBSで500倍に希釈した二次抗体を200 µLずつ滴下し、アルミホイルを被せて遮光しながら、室温で30分反応させます。 10.

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二重標識水法

二重標識水法で検討した日本人2型糖尿病患者のエネルギー消費量 2018年11月15日 11:46 プッシュ通知を受取る 125 名の先生が役に立ったと考えています。 研究の背景:日本糖尿病学会のエネルギー摂取量基準に根拠はなかった 日本糖尿病学会の最初の食事療法についての公式なガイドは『糖尿病治療のための食品交換表(第1版)』(1965年)である。このとき、糖尿病食事療法の原則として、①適正なエネルギー②糖質量の制限③糖質、蛋白質、脂質のバランス④ビタミンおよびミネラルの適正な補給―が挙げられた。この原則は②を除いて〔第5版(1993年)から②は完全に消失する〕現在まで継続しており、現在も日本糖尿病学会では、以下のようなエネルギー処方を「適正なエネルギー摂取量」として推奨している(『糖尿病治療ガイド2018-2019』)。 エネルギー摂取量=標準体重×身体活動量(軽労作25~30、普通労作30~35、重労作35~):男性では1, 600~2, 000kcal/日、女性では1, 400~1, 800kcal/日 しかし、このエネルギー摂取量は、以下に示す厚生労働省の食事摂取基準に比べて著しく低い設定である。 エネルギー摂取量=基礎代謝量(=現体重×20-25)×身体活動レベル(軽労作1. 5、普通労作1. 【特別講座】広がる重水素の用途｜siyaku blog｜試薬-富士フイルム和光純薬. 75、重労作2. 0)=現体重×身体活動レベル(軽労作30~37. 5、普通労作35~43.

[学会発表] ウトウの渡り・越冬生態 2012 著者名/発表者名 高橋晃周, 伊藤元裕, 鈴木優也, 綿貫豊, 山本誉士, 飯田高大, Phil Trathan, 新妻靖章, 桑名朝比呂 学会等名 日本鳥学会100周年記念大会 発表場所 東京都文京区 年月日 2012-09-15 関連する報告書 [学会発表] ウトウの渡り・越冬生態 著者名/発表者名 髙橋晃周,伊藤元裕,鈴木優也,綿貫豊,山本誉士,飯田高大,Phil Trathan,新妻靖章,桑名朝比呂 発表場所 東京 [学会発表] The food composition of Laysan and Black-footed Albatrosses in the North Pacific from 2010 to 2011 著者名/発表者名 Nakatsuka, S., Ochi, D., Inoue, Y., Yokawa, K., Ohizumi, H., Niizuma, Y., Minami, H. 学会等名 PICES 2012 Annual Meeting 発表場所 Hiroshima, Japan [学会発表] Factors influencing egg size of Rhinoceros Auklets in Teuri island, Japan. 著者名/発表者名 Suzuki, Y., Ito, M., Kazama, K., Niizuma, Y., Watanuki, Y. 学会等名 PSG's 40th Annual Meeting 発表場所 Portland, USA 関連する報告書